תכנון, עיצוב וייצור פפטידים
פפטידים הם חלבונים קצרים המורכבים מחומצות אמינו, בעלי פעילויות ביולוגיות מגוונות הממלאות תפקידים חשובים בטבע. פפטידים יוצרים משפחה חדשה של חומרים מחקריים וטיפוליים עם מגוון יישומים.
פפטידים רבים המופיעים באופן טבעי מתפקדים כהורמונים הממלאים תפקיד בהפעלה או ויסות של מסלולים תאיים שונים. בנוסף לפעילות ההפעלה והוויסות, זוהו מספר רעלנים מבוססי פפטידים שקוטעים את מסלולי הבקרה.
סוג אחר של פפטידים, מהם פקטורי גדילה למחקר העברת אותות תאיים. קיימים סובסטרטים ומעכבי פרוטאזות מבוססי פפטידים הזמינים מסחרית הן למחקר והן לשימוש טיפולי. בעשור האחרון ה- FDA אישר מספר תרופות מבוססות פפטידים לטיפול ב- HIV וסרטן. פפטידים משמשים גם ליישומים קוסמטיים מסוימים כמו אנטי אייג’ינג (הזדקנות).
סינתזת פפטידים בהתאמה אישית
אנו מסנתזים פפטידים מטוהרים באמצעות שיטות סינתזה Fmoc/Boc בפאזה מוצקה או נוזלית עבור מגוון יישומים.
ניתן לסנתז את הפפטידים בכמויות הנעות בין 1 גרם ל- 1 ק”ג.
אנו משתמשים בשיטות סינתזה אופטימליות, וכל שלב סינתזה מנוטר על מנת להשיג תפוקות גבוהות ורמות ניקיון גבוהות של הפפטידים.
ניתן לסנתז פפטידים עם חומצות אמינו טבעיות וסינטטיות, כמו גם פפטידים מוגנים לחלוטין, ציקליים או מורכבים.
שינויים ספציפיים לפפטיד
שינויים ב N-טרמינל: ביוטינילציה (הוספת ביוטין), אצטילציה (הוספת אצטיל), אצילציה (הוספת חומצות שומן) ושינויים נוספים.
שינויים ב C-טרמינל: COOH סטנדרטי, פפטיד-אמיד, פפטיד-הידראזיד, פפטיד-מתיל-אסטר ואלכוהול-פפטיד הם אופציונליים.
שינויים פנימיים בפפטיד: זרחון על סרין, תראונין או טירוזין, גליקוזילציה על אספרגין.
אנו יכולים גם לייצר פפטידים עם שינויים לא קונבנציונליים לפי דרישת הלקוח.
פפטידים כרומוגניים ופלואורגניים
ניתן לסמן פפטידים בצבעים כרומוגניים או פלואורסצנטיים כגוןDinitrophenol, Dansyl, Dabsyl, Fluorescein , ו- Rhodeamine ועוד צבעים רבים בכל הספקטרום הנראה, UV, ואורכי גל ייחודיים אחרים. ניתן להשתמש בפפטידים כרומוגניים ופלורוסנטיים למגוון יישומים, כגון למיקרוסקופיה פלואורסצנטית, ספקטרופוטומטריה, וניטור של סובסטרטים פפטידים בשיטות כגון ELISA.
ניתן לסמן פפטידים וחלבונים במגוון רחב של צבעים כרומוגניים ופלורוסנטיים לכל טווח הסקלה של האור הנראה וגם סמנים בטווחים המותאמים למיקרוסקופיה ייעודית.
צימוד פפטידים לחלבון נשא
צימוד פפטידים לנשא חלבוני לחיסון בבעלי חיים – הפפטיד מחובר לנשא חלבוני כמו BSA או KLH כדי לגרום לתגובה חיסונית חזקה יותר.
לחלופין, ניתן לסנתז את הפפטיד או לחבר אותו ל-MAPS
MAPS – Multiple Antigen Peptide System – המערכת המבוססת על מולקולת ליבה אינרטית ומסועפת אליה מחוברים מספר פפטידים, לרוב 4-8 פפטידים בעלי יחס מולרי גבוה של אנטיגן פפטיד למולקולת הליבה שיכולה לעורר תגובה חיסונית חזקה. ניתן לייצר את ה-MAPS עם אותו פפטיד אימונוגני או לחבר מספר פפטידים שונים המייצגים אתרים שונים בחלבון.
ספריות פפטידים וספריות קומבינטוריות
אנו משתמשים בשיטות סינתזה של מנות ערבוב כדי ליצור ספריות “חרוז אחד – תרכובת אחת” על בסיס מוצק או תערובות של ספריות מסיסות לשימוש ביישומים שונים.
* ספריות פפטידים אקראיות – לסריקה של ליגנדים פפטידים.
* ספריות ספציפיות לאתר Epitop – שמתוכננות במיוחד לסריקה של סובסטרטים ומעכבים לאנזימים.
* ספריות כימיות – מבוססות חומרים טבעיים או סינתטיים.
ניתן להשתמש באבני בניין טבעיות וגם סינתטיות במהלך העיצוב והייצור של הספרייה.
פפטידים ליישומים אימונולוגיים
תכנון, עיצוב וסינתזה של פפטידים אימונוגניים.
צימוד פפטידים לנשאי חלבון לצורך חיסון – הפפטיד מחובר לנשא חלבון כמו BSA או KLH כדי לגרום לתגובה חיסונית חזקה יותר.
MAPS – Multiple Antigen Peptide System – המערכת המבוססת על מולקולת ליבה אינרטית ומסועפת שעליה מחוברים מספר פפטידים – עם יחס מולרי גבוה של אנטיגן פפטיד למולקולת הליבה שיכולה לעורר תגובה חיסונית חזקה.
שימוש בכלים ביואינפורמטיים לעיצוב פפטידים אימונוגניים נבחרים מחלבון המטרה.
ייצור פפטידים אימונוגניים על ידי שיטות סינתזה Fmoc/Boc שלב מוצק. הפפטידים עוברים בדיקות מדגמיות לניטור הסינתזה במהלך שלבי הייצור. בתום הייצור, הפפטידים האימונוגניים מטוהרים ונבדקים על ידי כרומטוגרפיה נוזלית (HPLC) וספקטרומטריית מסה (MS).
אנו משתמשים בשיטות סינתזה אופטימליות, וכל שלב סינתזה מנוטר על מנת להשיג תפוקות גבוהות ורמות טוהר גבוהות של הפפטידים להשגת נוגדנים ספציפיים מאוחר יותר.
ניתן לסנתז את הפפטידים בכמויות הנעות בין 1 גרם ל-1 ק”ג.
עמודות זיקה מבוססות פפטידים
עמודות זיקה עם פפטיד קשור לפי בחירה על מטריצה מוצקה ופורוזיבית לטיהור זיקה של חלבונים דוגמת נוגדנים, אנזימים ורצפטורים.
פיתוח שיטות טיהור ובידוד חלבונים על עמודות זיקה ייעודיות.
ייצור וטיהור נוגדנים
עיצוב וסינתזה של פפטידים אימונוגניים במיוחד עבור חיסון בעלי חיים, MAPS – Multiple Antigen Peptide Systems, צימוד לנשאי חלבון, חיסון בעלי חיים וייצור נוגדנים פולקלונליים ספציפיים לפפטיד, וטיהור זיקה של נוגדנים.
שירותים אנליטיים לפפטידים
אנליזת פפטידים בשיטות של: HPLC Reverse Phase ,FPLC, אנליזת חומצות אמינו, ריצוף פפטידים וספקטרומטריית מסה.